有關C18色譜柱的安裝步驟,這里有詳細說明
更新時間:2020-11-26 點擊次數:2950次
C18色譜柱可分為填充柱和開管柱兩大類。多為金屬或玻璃制作。有直管形、盤管形、U形管等形狀。液相色譜通常均采用填充柱。
C18色譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及C18色譜柱的制備和操作條件。
色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的C18色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對C18色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10μm等,柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難分離物質對則可采用高達2萬的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。
柱效受柱內外因素影響,為使C18色譜柱達到*效率,除柱外死體積要小外,還要有合理的柱結構及裝填技術。即使*的裝填技術,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的,靠近管壁的部位比較疏松,易產生溝流,流速較快,影響沖洗劑的流形,使譜帶加寬,這就是管壁效應。這種管壁區(qū)大約是從管壁向內算起30倍粒徑的厚度。在一般的液相色譜系統(tǒng)中,柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。
C18色譜柱的安裝:
1、首先應確認柱和儀器的接頭以及管路是否匹配。為減少死體積,進樣閥、柱子、檢測器之間的連接管路內徑盡可能使用內徑較小的管線,同時控制進樣器、C18色譜柱和檢測器之間連接管線的長度。安裝C18色譜柱之前,確認流路系統(tǒng)中的溶劑是否正常。對分析較復雜的樣品建議安裝保護柱。
2、為了使C18色譜柱與儀器系統(tǒng)達*的連接效果,應盡量使用與C18色譜柱接口相匹配的螺帽和錐形接頭,如原來的接頭長期匹配其他類型的C18色譜柱,建議在連接新C18色譜柱前應檢查匹配情況,避免造成C18色譜柱的損壞或因C18色譜柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接頭,只需用手擰緊不需要特定扳手,使用壓力為5000psi;使用溫度不得超過100℃。